பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் என்றால் என்ன?

பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்

ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் என்பது உயிரியல் துறைகளில் உள்ள ஆய்வகங்களில் ஒரு அடிப்படை நுட்பமாகும், இது டிஎன்ஏ, ஆர்என்ஏ மற்றும் புரதங்கள் போன்ற பெரிய மூலக்கூறுகளை பிரிக்க அனுமதிக்கிறது. வெவ்வேறு பிரிப்பு ஊடகங்கள் மற்றும் வழிமுறைகள் இந்த மூலக்கூறுகளின் துணைக்குழுக்களை அவற்றின் இயற்பியல் பண்புகளைப் பயன்படுத்தி மிகவும் திறம்பட பிரிக்க அனுமதிக்கின்றன. குறிப்பாக புரதங்களுக்கு, பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (PAGE) பெரும்பாலும் தேர்வு நுட்பமாகும்.

PAGE என்பது புரோட்டீன்கள் போன்ற மேக்ரோமிகுலூல்களை அவற்றின் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கத்தின் அடிப்படையில் பிரிக்கும் ஒரு நுட்பமாகும், அதாவது எதிர் மின்னோட்டத்தை நோக்கி நகரும் பகுப்பாய்வுகளின் திறன். PAGE இல், இது மூலக்கூறின் கட்டணம், அளவு (மூலக்கூறு எடை) மற்றும் வடிவத்தால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் உருவாகும் துளைகள் வழியாக பகுப்பாய்வுகள் நகரும். டிஎன்ஏ மற்றும் ஆர்என்ஏ போலல்லாமல், புரதங்கள் இணைக்கப்பட்ட அமினோ அமிலங்களைப் பொறுத்து மாறுபடும், அவை எவ்வாறு இயங்குகின்றன என்பதைப் பாதிக்கலாம். அமினோ அமில சரங்கள் அவற்றின் வெளிப்படையான அளவை பாதிக்கும் இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்புகளையும் உருவாக்கலாம் மற்றும் அதன் விளைவாக அவை துளைகள் வழியாக எவ்வாறு நகர முடியும். எனவே சில சமயங்களில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்கு முன் புரதங்களை குறைப்பது விரும்பத்தக்கதாக இருக்கும், அளவை மிகவும் துல்லியமான மதிப்பீடு தேவைப்பட்டால் அவற்றை நேர்கோட்டாக மாற்றலாம்.

SDS பக்கம்

சோடியம்-டோடெசில் சல்பேட் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் என்பது 5 முதல் 250 kDa வரையிலான புரத மூலக்கூறுகளைப் பிரிக்கப் பயன்படும் ஒரு நுட்பமாகும். புரதங்கள் அவற்றின் மூலக்கூறு எடையின் அடிப்படையில் மட்டுமே பிரிக்கப்படுகின்றன. சோடியம் டோடெசில் சல்பேட், ஒரு அயோனிக் சர்பாக்டான்ட், ஜெல் தயாரிப்பில் சேர்க்கப்படுகிறது, இது புரத மாதிரிகளின் உள்ளார்ந்த கட்டணங்களை மறைக்கிறது மற்றும் வெகுஜன விகிதத்திற்கு ஒத்த கட்டணத்தை அளிக்கிறது. எளிமையான வார்த்தைகளில், இது புரதங்களை குறைத்து எதிர்மறையான கட்டணத்தை அளிக்கிறது.

சொந்த பக்கம்

நேட்டிவ் பேஜ் என்பது புரோட்டீன்களைப் பிரிப்பதற்காக நீக்கப்படாத ஜெல்களைப் பயன்படுத்தும் ஒரு நுட்பமாகும். SDS PAGE போலல்லாமல், ஜெல்களை தயாரிப்பதில் எந்தக் குறைப்பு முகவர் சேர்க்கப்படவில்லை. இதன் விளைவாக, புரதங்களின் சார்ஜ் மற்றும் புரதங்களின் அளவு ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் புரதங்களின் பிரிப்பு நடைபெறுகிறது. இந்த நுட்பத்தில், புரதங்களின் இணக்கம், மடிப்பு மற்றும் அமினோ அமில சங்கிலிகள் ஆகியவை பிரிப்பு சார்ந்து இருக்கும் காரணிகளாகும். இந்த செயல்பாட்டில் புரதங்கள் சேதமடையாது, பிரித்தெடுத்த பிறகு மீட்டெடுக்க முடியும்.

பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (PAGE) எப்படி வேலை செய்கிறது?

PAGE இன் அடிப்படைக் கொள்கையானது மின்னோட்டத்தைப் பயன்படுத்தி பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லின் துளைகள் வழியாக பகுப்பாய்வுகளை பிரிப்பதாகும். இதை அடைய, அம்மோனியம் பெர்சல்பேட் (APS) சேர்ப்பதன் மூலம் அக்ரிலாமைடு-பைசாக்ரிலாமைடு கலவை பாலிமரைஸ் செய்யப்படுகிறது (பாலிஅக்ரிலாமைடு). டெட்ராமெதிலெதிலினெடியமைன் (TEMED) மூலம் வினையூக்கப்படும் எதிர்வினையானது, பகுப்பாய்விகள் நகரக்கூடிய துளைகளுடன் கூடிய வலை போன்ற கட்டமைப்பை உருவாக்குகிறது (படம் 2). ஜெல்லில் சேர்க்கப்பட்டுள்ள மொத்த அக்ரிலாமைட்டின் அதிக சதவீதம், துளை அளவு சிறியது, எனவே சிறிய புரதங்கள் வழியாக செல்ல முடியும். அக்ரிலாமைடு மற்றும் பைசாக்ரிலாமைடு விகிதம் துளையின் அளவையும் பாதிக்கும், ஆனால் இது பெரும்பாலும் மாறாமல் இருக்கும். சிறிய துளை அளவுகள் சிறிய புரதங்கள் ஜெல் வழியாக நகரும் வேகத்தைக் குறைக்கின்றன, அவற்றின் தெளிவுத்திறனை மேம்படுத்துகின்றன மற்றும் மின்னோட்டம் பயன்படுத்தப்படும்போது அவை விரைவாக இடையகத்திற்குள் ஓடுவதைத் தடுக்கின்றன.

பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான உபகரணங்கள்

ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல் (டேங்க்/சேம்பர்)
பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான ஜெல் டேங்க் (PAGE) அகரோஸ் ஜெல் டேங்கிலிருந்து வேறுபட்டது. அகரோஸ் ஜெல் தொட்டி கிடைமட்டமாகவும், PAGE தொட்டி செங்குத்தாகவும் இருக்கும். செங்குத்து எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல் (டேங்க்/சேம்பர்) மூலம், ஒரு மெல்லிய ஜெல் (சாதாரணமாக 1.0 மிமீ அல்லது 1.5 மிமீ) இரண்டு கண்ணாடி தகடுகளுக்கு இடையே ஊற்றப்பட்டு, ஜெல்லின் அடிப்பகுதி ஒரு அறையில் உள்ள பஃபரில் மூழ்கி, மேல் பகுதி தாங்கலில் மூழ்கும் வகையில் பொருத்தப்படுகிறது. மற்றொரு அறையில். மின்னோட்டம் பயன்படுத்தப்படும் போது, ​​சிறிய அளவு தாங்கல் ஜெல் வழியாக மேல் அறையிலிருந்து கீழ் அறைக்கு நகர்கிறது. அசெம்பிளி செங்குத்தான நிலையில் இருக்க உறுதியளிக்கும் வலுவான கவ்விகளுடன், தனித்தனி பட்டைகளை உருவாக்குவதன் விளைவாக சீரான குளிர்ச்சியுடன் கூடிய வேகமான ஜெல் ஓட்டங்களை இந்த உபகரணங்கள் எளிதாக்குகின்றன.

பெய்ஜிங் லியுயி பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட் (லியுயி பயோடெக்னாலஜி) பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல்கள் (தொட்டிகள்/அறைகள்) அளவுகளின் வரம்பை உற்பத்தி செய்கிறது. மாதிரிகள் DYCZ-20C மற்றும் DYCZ-20G ஆகியவை டிஎன்ஏ வரிசைமுறை பகுப்பாய்வுக்கான செங்குத்து எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல்கள் (டாங்கிகள்/அறைகள்) ஆகும். DYCZ-24DN, DYCZ-25D மற்றும் DYCZ-25E போன்ற சில செங்குத்து எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல்கள் (டாங்கிகள்/சேம்பர்கள்) பிளாட்டிங் சிஸ்டத்துடன் இணக்கமானவை, வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் சிஸ்டம் மாதிரி DYCZ-40D, DYCZ-40G மற்றும் DYCZ-40 புரத மூலக்கூறை ஜெல்லில் இருந்து சவ்வுக்கு மாற்றப் பயன்படுகிறது. SDS-PAGE எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்குப் பிறகு, வெஸ்டர்ன் ப்ளாட்டிங் என்பது ஒரு புரத கலவையில் ஒரு குறிப்பிட்ட புரதத்தைக் கண்டறியும் ஒரு நுட்பமாகும். சோதனைத் தேவைகளுக்கு ஏற்ப இந்த ப்ளாட்டிங் அமைப்புகளை நீங்கள் தேர்வு செய்யலாம்.

எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பவர் சப்ளை
ஜெல்லை இயக்குவதற்கான மின்சாரத்தை வழங்க, உங்களுக்கு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மின்சாரம் தேவைப்படும். லியுயி பயோடெக்னாலஜியில் அனைத்து பயன்பாடுகளுக்கும் பலவிதமான எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பவர் சப்ளைகளை நாங்கள் வழங்குகிறோம். உயர் நிலையான மின்னழுத்தம் மற்றும் மின்னோட்டத்துடன் கூடிய மாதிரி DYY-12 மற்றும் DYY-12C உயர் மின்னழுத்தத் தேவை எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பூர்த்தி செய்ய முடியும். இது ஸ்டாண்ட், டைமிங், விஎச் மற்றும் படி-படி-படி பயன்பாடு ஆகியவற்றின் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. அவை IEF மற்றும் DNA வரிசைமுறை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பயன்பாட்டிற்கு ஏற்றவை. பொதுவான புரதம் மற்றும் டிஎன்ஏ எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பயன்பாட்டிற்கு, எங்களிடம் மாதிரி DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 மற்றும் பல உள்ளன, இவை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் செல்கள் (டாங்கிகள்/சேம்பர்கள்) கொண்ட வெப்பமான விற்பனை மின் விநியோகம் ஆகும். பள்ளி ஆய்வக பயன்பாடு, மருத்துவமனை ஆய்வகம் மற்றும் பல போன்ற நடுத்தர மற்றும் குறைந்த மின்னழுத்த எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பயன்பாடுகளுக்கு இவை பயன்படுத்தப்படலாம். மின்சாரம் வழங்குவதற்கான கூடுதல் மாதிரிகள், எங்கள் வலைத்தளத்தைப் பார்வையிடவும்.

Liuyi பிராண்ட் சீனாவில் 50 ஆண்டுகளுக்கும் மேலான வரலாற்றைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் நிறுவனம் உலகம் முழுவதும் நிலையான மற்றும் உயர்தர தயாரிப்புகளை வழங்க முடியும். பல வருட வளர்ச்சியின் மூலம், இது உங்கள் விருப்பத்திற்கு தகுதியானது!

எங்களைப் பற்றிய கூடுதல் தகவலுக்கு, மின்னஞ்சல் மூலம் எங்களைத் தொடர்பு கொள்ளவும்[மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது] or [மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது].

பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் என்றால் என்ன?
1. கரேன் ஸ்டீவர்டு PhD பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ், இது எப்படி வேலை செய்கிறது, தொழில்நுட்ப மாறுபாடுகள் மற்றும் அதன் பயன்பாடுகள்