செல்லுலோஸ் அசிடேட் மெம்ப்ரேன் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்துவதற்கு கடந்த வாரம் பல பரிசீலனைகளைப் பகிர்ந்து கொண்டோம், மேலும் உங்கள் குறிப்புக்காக இந்த தலைப்பை இன்று இங்கே முடிப்போம்.
தேர்வு தாங்கல் செறிவு
செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் பயன்படுத்தப்படும் பஃபர் செறிவு பொதுவாக காகித எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் பயன்படுத்தப்படுவதை விட குறைவாக உள்ளது. பொதுவாக பயன்படுத்தப்படும் pH 8.6Bநடுநிலை இடையகமானது பொதுவாக 0.05 mol/L முதல் 0.09 mol/L வரையிலான வரம்பிற்குள் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகிறது. செறிவைத் தேர்ந்தெடுக்கும்போது, ஒரு ஆரம்ப தீர்மானம் செய்யப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் அறையில் உள்ள மின்முனைகளுக்கு இடையே உள்ள சவ்வு துண்டு நீளம் 8-10cm ஆக இருந்தால், சவ்வு நீளத்தின் ஒரு சென்டிமீட்டருக்கு 25V மின்னழுத்தம் தேவைப்படுகிறது, மேலும் தற்போதைய தீவிரம் சவ்வு அகலத்தில் ஒரு சென்டிமீட்டருக்கு 0.4-0.5 mA ஆக இருக்க வேண்டும். எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் போது இந்த மதிப்புகள் அடையப்படாவிட்டால் அல்லது மீறப்பட்டால், தாங்கல் செறிவு அதிகரிக்கப்பட வேண்டும் அல்லது நீர்த்தப்பட வேண்டும்.
அதிகப்படியான குறைந்த தாங்கல் செறிவு பட்டைகளின் விரைவான இயக்கம் மற்றும் பட்டையின் அகலம் அதிகரிக்கும். மறுபுறம், அதிகப்படியான இடையக செறிவு இசைக்குழு இடம்பெயர்வை மெதுவாக்கும், சில பிரிப்பு பட்டைகளை வேறுபடுத்துவது கடினம்.
செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில், மின்னோட்டத்தின் குறிப்பிடத்தக்க பகுதி மாதிரி மூலம் நடத்தப்படுகிறது, இது கணிசமான அளவு வெப்பத்தை உருவாக்குகிறது என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். சில நேரங்களில், தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட இடையக செறிவு பொருத்தமானதாக கருதப்படலாம். இருப்பினும், அதிகரித்த சுற்றுச்சூழல் வெப்பநிலையின் கீழ் அல்லது அதிக மின்னழுத்தத்தைப் பயன்படுத்தும் போது, வெப்பத்தின் காரணமாக நீரின் ஆவியாதல் தீவிரமடைகிறது, இதன் விளைவாக அதிகப்படியான தாங்கல் செறிவு மற்றும் சவ்வு வறண்டு போகலாம்.
மாதிரி தொகுதி
செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில், எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் நிலைமைகள், மாதிரியின் பண்புகள், கறை படிதல் முறைகள் மற்றும் கண்டறிதல் நுட்பங்கள் உள்ளிட்ட பல்வேறு காரணிகளால் மாதிரி தொகுதி அளவு தீர்மானிக்கப்படுகிறது. ஒரு பொதுவான கொள்கையாக, கண்டறிதல் முறை அதிக உணர்திறன் கொண்டது, மாதிரி அளவு சிறியதாக இருக்கலாம், இது பிரிப்பதற்கு சாதகமானது. மாதிரி அளவு அதிகமாக இருந்தால், எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் பிரிப்பு முறைகள் தெளிவாக இருக்காது, மேலும் கறை படிதல் நேரத்தை எடுத்துக்கொள்ளும். எவ்வாறாயினும், எலுஷன் கலர்மெட்ரிக் கண்டறிதல் முறைகளைப் பயன்படுத்தி பிரிக்கப்பட்ட கறை படிந்த பட்டைகளை அளவுரீதியாக பகுப்பாய்வு செய்யும் போது, மாதிரி அளவு மிகவும் சிறியதாக இருக்கக்கூடாது, ஏனெனில் இது சில கூறுகளுக்கு குறைந்த உறிஞ்சுதல் மதிப்புகளை விளைவிக்கலாம், இது அவற்றின் உள்ளடக்கத்தை கணக்கிடுவதில் அதிக பிழைகளுக்கு வழிவகுக்கும். இதுபோன்ற சந்தர்ப்பங்களில், மாதிரி அளவை சரியான முறையில் அதிகரிக்க வேண்டும்.
பொதுவாக, மாதிரி பயன்பாட்டு வரியின் ஒவ்வொரு சென்டிமீட்டரிலும் சேர்க்கப்படும் மாதிரி அளவு 0.1 முதல் 5 μL வரை இருக்கும், இது மாதிரி அளவு 5 முதல் 1000 μg வரை இருக்கும். எடுத்துக்காட்டாக, வழக்கமான சீரம் புரத எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பகுப்பாய்வில், பயன்பாட்டு வரியின் ஒவ்வொரு சென்டிமீட்டரிலும் சேர்க்கப்படும் மாதிரி அளவு பொதுவாக 1 μL ஐ விட அதிகமாக இருக்காது, இது 60 முதல் 80 μg புரதத்திற்கு சமம். இருப்பினும், அதே எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் முறையைப் பயன்படுத்தி லிப்போபுரோட்டீன்கள் அல்லது கிளைகோபுரோட்டீன்களை பகுப்பாய்வு செய்யும் போது, மாதிரி அளவை அதிகரிக்க வேண்டும்.
முடிவில், தொடர்ச்சியான பூர்வாங்க சோதனைகள் மூலம் குறிப்பிட்ட நிபந்தனைகளின் அடிப்படையில் மிகவும் பொருத்தமான மாதிரி தொகுதி தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும்.
கறை தீர்வு தேர்வு
செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் உள்ள பிரிக்கப்பட்ட பட்டைகள் பொதுவாக கண்டறிவதற்கு முன் படிந்திருக்கும். வெவ்வேறு மாதிரி கூறுகளுக்கு வெவ்வேறு கறை படிதல் முறைகள் தேவைப்படுகின்றன, மேலும் செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்கு ஏற்ற கறை படிதல் முறைகள் வடிகட்டி காகிதத்திற்கு முற்றிலும் பொருந்தாது.
கறை படிந்த தீர்வைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கு மூன்று முக்கிய கொள்கைகள் உள்ளனசெல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு. முதலில்,ஆல்கஹால் கரையக்கூடிய சாயங்களை விட நீரில் கரையக்கூடிய சாயங்கள் விரும்பத்தக்கதாக இருக்க வேண்டும். கறை படிந்த பிறகு, மென்படலத்தை தண்ணீரில் துவைப்பது மற்றும் கறை படிந்த காலத்தைக் குறைப்பது முக்கியம். இல்லையெனில், சவ்வு சுருண்டிருக்கலாம் அல்லது சுருங்கலாம், இது அடுத்தடுத்த கண்டறிதலை பாதிக்கும்.
இரண்டாவதாக, மாதிரிக்கு வலுவான கறையுடன் கூடிய சாயங்களைத் தேர்ந்தெடுப்பது விரும்பத்தக்கது. சீரம் புரதங்களின் செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில், அமினோ பிளாக் 10B பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, ஏனெனில் பல்வேறு சீரம் புரதக் கூறுகள் மற்றும் அதன் நிலைப்புத்தன்மைக்கு வலுவான கறை படிதல் காரணமாகும்.
மூன்றாவதாக, நம்பகமான தரமான சாயங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும். சில சாயங்கள், அதே பெயரில் இருந்தாலும், கறை படிந்த பிறகு குறிப்பாக இருண்ட பின்னணியில் அசுத்தங்கள் இருக்கலாம். இது முதலில் நன்கு பிரிக்கப்பட்ட பட்டைகளை மங்கலாக்கி, வேறுபடுத்துவது கடினம்.
கடைசியாக, கறை தீர்வு செறிவு தேர்வு முக்கியமானது. கோட்பாட்டளவில், அதிக கறை தீர்வு செறிவு மாதிரி கூறுகளின் முழுமையான கறை மற்றும் சிறந்த கறை முடிவுகளுக்கு வழிவகுக்கும் என்று தோன்றலாம். எனினும், இது அவ்வாறு இல்லை. மாதிரி கூறுகள் மற்றும் சாயத்திற்கு இடையேயான பிணைப்பு தொடர்பு ஒரு குறிப்பிட்ட வரம்பைக் கொண்டுள்ளது, இது கறை படிந்த தீர்வு செறிவு அதிகரிப்புடன் அதிகரிக்காது. மாறாக, அதிகப்படியான கறை படிந்த கரைசல் செறிவு சாயத்தை வீணாக்குவது மட்டுமல்லாமல் தெளிவான பின்னணியை அடைவதையும் கடினமாக்குகிறது. மேலும், வண்ணத் தீவிரம் ஒரு குறிப்பிட்ட அதிகபட்ச மதிப்பை அடையும் போது, சாயத்தின் உறிஞ்சுதல் வளைவு நேரியல் உறவைப் பின்பற்றாது, குறிப்பாக அளவு அளவீடுகளில். செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸில், கறை படிந்த கரைசல் செறிவு பொதுவாக காகித எலக்ட்ரோபோரேசிஸில் பயன்படுத்தப்படுவதை விட குறைவாக இருக்கும்.
பெய்ஜிங் லியுயி பயோடெக்னாலஜி பற்றி தெரிந்து கொள்ள வேண்டிய விவரங்கள்'s செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வுஎலக்ட்ரோபோரேசிஸ் தொட்டி மற்றும் அதன் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பயன்பாடு, தயவுசெய்து இங்கே பார்வையிடவும்:
எல்செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு மூலம் சீரம் புரதத்தைப் பிரிப்பதற்கான பரிசோதனை
எல்செல்லுலோஸ் அசிடேட் மெம்பிரேன் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்
எல்செல்லுலோஸ் அசிடேட் மெம்பிரேன் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் (1) பயன்படுத்தும் போது பல கருத்தில் கொள்ள வேண்டும்
எங்கள் தயாரிப்புகளுக்கு ஏதேனும் கொள்முதல் திட்டம் இருந்தால், எங்களைத் தொடர்புகொள்ள தயங்க வேண்டாம். மின்னஞ்சலில் எங்களுக்கு செய்தி அனுப்பலாம்[மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது]அல்லது[மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது], அல்லது எங்களை +86 15810650221 என்ற எண்ணில் அழைக்கவும் அல்லது Whatsapp +86 15810650221 அல்லது Wechat: 15810650221 ஐச் சேர்க்கவும்.
குறிப்பு:எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்(இரண்டாம் பதிப்பு) திரு. லி
இடுகை நேரம்: ஜூன்-06-2023