ஹீமோகுளோபின் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பரிசோதனை

பரிசோதனைக் கோட்பாடு

ஹீமோகுளோபின் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பல்வேறு சாதாரண மற்றும் அசாதாரண ஹீமோகுளோபின்களைக் கண்டறிந்து உறுதிப்படுத்துவதை நோக்கமாகக் கொண்டுள்ளது.

வெவ்வேறு ஹீமோகுளோபின் வகைகளின் வெவ்வேறு கட்டணங்கள் மற்றும் ஐசோஎலக்ட்ரிக் புள்ளிகள் காரணமாக, ஒரு குறிப்பிட்ட pH தாங்கல் கரைசலில், ஹீமோகுளோபினின் ஐசோஎலக்ட்ரிக் புள்ளி தாங்கல் கரைசலின் pH ஐ விட குறைவாக இருக்கும்போது, ​​ஹீமோகுளோபின் எதிர்மறை மின்னூட்டத்தைச் சுமந்து, எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் போது எதிர்முனையை நோக்கி நகர்கிறது. நேர்மாறாக, நேர்மறை மின்னூட்டத்துடன் கூடிய ஹீமோகுளோபின் கத்தோடை நோக்கி நகர்கிறது.

ஒரு குறிப்பிட்ட மின்னழுத்தத்தின் கீழ் மற்றும் ஒரு குறிப்பிட்ட எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் நேரத்திற்குப் பிறகு, வெவ்வேறு கட்டணங்கள் மற்றும் மூலக்கூறு எடைகள் கொண்ட ஹீமோகுளோபின்கள் வெவ்வேறு இடம்பெயர்வு திசைகள் மற்றும் வேகங்களை வெளிப்படுத்துகின்றன. இது தனித்தனி மண்டலங்களைப் பிரிக்க அனுமதிக்கிறது, மேலும் பல்வேறு ஹீமோகுளோபின்களை அளவிடுவதற்கு இந்த மண்டலங்களில் வண்ணமயமான அல்லது எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் ஸ்கேனிங் பகுப்பாய்வு செய்யப்படலாம். மிகவும் பொதுவாக பயன்படுத்தப்படும் முறை pH 8.6 செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் ஆகும்.

சைட்டோபிளாஸிற்குள், கிளைகோஜன் அல்லது பாலிசாக்கரைடு பொருட்களில் உள்ள எத்திலீன் கிளைகோல் குழுக்கள் (CHOH-CHOH) (மியூகோபோலிசாக்கரைடுகள், மியூகோபுரோட்டின்கள், கிளைகோபுரோட்டின்கள், கிளைகோலிப்பிடுகள் போன்றவை) ஆக்சிஜனேற்றம் செய்யப்பட்டு ஆல்டிஹைடு குழுக்களாக (CHO-CHO) மாற்றப்படுகின்றன. இந்த ஆல்டிஹைட் குழுக்கள் நிறமற்ற ஊதா-சிவப்பு ஷிஃப் ரீஜென்ட் உடன் இணைந்து, ஒரு ஊதா-சிவப்பு சாயத்தை உருவாக்குகிறது, இது கலத்தில் பாலிசாக்கரைடுகள் இருக்கும் இடத்தில் படிகிறது. இந்த எதிர்வினை பீரியடிக் ஆசிட்-ஸ்கிஃப் (பிஏஎஸ்) கறை என அறியப்படுகிறது, இது முன்பு கிளைகோஜன் கறை என குறிப்பிடப்பட்டது.

பரிசோதனை முறை

பொருட்கள்:செல்லுலோஸ் அசிடேட்மேம்பிரான், எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் கருவி(DYCP-38C மற்றும் மின்சாரம் DYY-6C), சிறந்த மாதிரி ஏற்றுதல் கருவி(குழாய்), ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டர், கலர்மெட்ரிக் குவெட்டுகள், இடையகங்கள்.

தாங்கல்:

(1) pH 8.6 TEB தாங்கல்: எடை 10.29 கிராம் டிரிஸ், 0.6 கிராம் ஈடிடிஏ, 3.2 கிராம் போரிக் அமிலம், மற்றும் 1000 மில்லிக்கு காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரை சேர்க்கவும்.

(2) போரேட் பஃபர்: 6.87 கிராம் போராக்ஸ் மற்றும் 5.56 கிராம் போரிக் அமிலம், மற்றும் 1000 மில்லிக்கு காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரை சேர்க்கவும்.

நடைமுறை:

Pஹீமோகுளோபின் தீர்வு நிவாரணம்

ஹெப்பரின் அல்லது சோடியம் சிட்ரேட் கொண்ட 3 மில்லி இரத்தத்தை ஒரு ஆன்டிகோகுலண்டாக எடுத்துக் கொள்ளுங்கள். 10 நிமிடங்களுக்கு 2000 ஆர்பிஎம்மில் மையவிலக்கு செய்து பிளாஸ்மாவை நிராகரிக்கவும். இரத்த சிவப்பணுக்களை உடலியல் உமிழ்நீருடன் மூன்று முறை கழுவவும் (750 ஆர்பிஎம், ஒவ்வொரு முறையும் 5 நிமிட மையவிலக்கு). 10 நிமிடங்களுக்கு 2200 ஆர்பிஎம்மில் மையவிலக்கு செய்து, சூப்பர்நேட்டன்ட்டை நிராகரிக்கவும். சம அளவு காய்ச்சி வடிகட்டிய தண்ணீரைச் சேர்க்கவும், பின்னர் கார்பன் டெட்ராகுளோரைட்டின் அளவை விட 0.5 மடங்கு சேர்க்கவும். 5 நிமிடங்களுக்கு தீவிரமாக குலுக்கி, பின்னர் 2200 ஆர்பிஎம்மில் மையவிலக்கு 10 நிமிடங்களுக்கு மேல் Hb கரைசலை சேகரிக்கவும்.

சவ்வு ஊறவைத்தல்

செல்லுலோஸ் அசிடேட் மென்படலத்தை 3 செமீ × 8 செமீ அளவுள்ள கீற்றுகளாக வெட்டுங்கள். அவற்றை pH 8.6 TEB பஃப்பரில் முழுமையாக நிறைவுறும் வரை ஊறவைக்கவும், பின்னர் அகற்றி வடிகட்டி காகிதத்தில் உலர வைக்கவும்.

ஸ்பாட்டிங்

10 μl ஹீமோகுளோபின் கரைசலை செங்குத்தாக செல்லுலோஸ் அசிடேட் மென்படலத்தில் (கரடுமுரடான பக்கம்), விளிம்பிலிருந்து 1.5 செ.மீ.

எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்

போரேட் பஃபர் கரைசலை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் அறைக்குள் ஊற்றவும். செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வை அறையின் கேத்தோடு முனையில் புள்ளிகள் உள்ள பக்கத்துடன் வைக்கவும். 30 நிமிடங்களுக்கு 200 V இல் இயக்கவும்.

நீக்குதல்

HbA மற்றும் HbA2 மண்டலங்களை வெட்டி, அவற்றை தனித்தனி சோதனைக் குழாய்களில் வைத்து, முறையே 15 மில்லி மற்றும் 3 மில்லி காய்ச்சி வடிகட்டிய தண்ணீரைச் சேர்க்கவும். ஹீமோகுளோபினை முழுவதுமாக குறைக்க மெதுவாக குலுக்கி, பின்னர் கலக்கவும்.

வண்ண அளவீடு

எலுஷன் கரைசலுக்கு காய்ச்சி வடிகட்டிய தண்ணீரைப் பயன்படுத்தி உறிஞ்சுதலை பூஜ்ஜியமாக்குங்கள் மற்றும் உறிஞ்சுதலை 415 nm இல் அளவிடவும்.

கணக்கீடு

HbA2(%) = HbA2 குழாயின் உறிஞ்சுதல் / (HbA குழாயின் உறிஞ்சுதல் × 5 + HbA2 குழாயின் உறிஞ்சுதல்) × 100%

சோதனை முடிவுகள் கணக்கீடு

pH 8.6 TEB பஃபர் செல்லுலோஸ் அசிடேட் எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான குறிப்பு வரம்பு: HbA > 95%, HbA2 1%-3.1%

குறிப்புகள்

எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் நேரம் மிக நீண்டதாக இருக்கக்கூடாது. எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் போது செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு வறண்டு போகக்கூடாது. HbA மற்றும் HbA2 தெளிவாகப் பிரிக்கப்படும்போது எலக்ட்ரோபோரேசிஸை நிறுத்துங்கள். நீடித்த எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பட்டை பரவல் மற்றும் மங்கலை ஏற்படுத்தும்.

அதிகப்படியான மாதிரியைப் பயன்படுத்துவதைத் தவிர்க்கவும். அதிகப்படியான ஹீமோகுளோபின் திரவமானது பேண்ட் பற்றின்மை அல்லது போதுமான கறைக்கு வழிவகுக்கும், இதன் விளைவாக HbA அளவுகள் தவறாக அதிகரிக்கலாம்.

புரதங்களுடன் செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு மாசுபடுவதைத் தடுக்கவும்.

மின்னோட்டம் மிக அதிகமாக இருக்கக்கூடாது; இல்லையெனில், ஹீமோகுளோபின் பட்டைகள் பிரிக்க முடியாது.

எப்போதும் சாதாரண நபர்களிடமிருந்து மாதிரிகள் மற்றும் தேவையான அறியப்பட்ட அசாதாரண ஹீமோகுளோபின்களைக் கட்டுப்பாடுகளாகச் சேர்க்கவும்.

பெய்ஜிங் லியுயி பயோடெக்னாலஜி ஹீமோகுளோபின் எலக்ட்ரோபோரேசிஸிற்கான தொழில்முறை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் தொட்டியை உற்பத்தி செய்கிறதுDYCP-38Cசெல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் டேங்க், மற்றும் செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் டேங்கிற்கு எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் பவர் சப்ளையின் இரண்டு மாதிரிகள் உள்ளன.DYY-2Cமற்றும்DYY-6Cமின்சாரம்.

இதற்கிடையில், பெய்ஜிங் லியுயி பயோடெக்னாலஜி வாடிக்கையாளர்களுக்கு செல்லுலோஸ் அசிடேட் சவ்வை வழங்குகிறது, மேலும் செல்லுலோஸ் அசிடேட் மென்படலத்தின் அளவை தனிப்பயனாக்கலாம். மாதிரிகள் மற்றும் கூடுதல் தகவல்களை எங்களிடம் கேட்க வரவேற்கிறோம்.

பெய்ஜிங் லியுயி பிராண்ட் சீனாவில் 50 ஆண்டுகளுக்கும் மேலான வரலாற்றைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் நிறுவனம் உலகம் முழுவதும் நிலையான மற்றும் உயர்தர தயாரிப்புகளை வழங்க முடியும். பல வருட வளர்ச்சியின் மூலம், இது உங்கள் விருப்பத்திற்கு தகுதியானது!

நாங்கள் இப்போது கூட்டாளர்களைத் தேடுகிறோம், OEM எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் தொட்டி மற்றும் விநியோகஸ்தர்கள் இருவரும் வரவேற்கப்படுகிறார்கள்.

எங்கள் தயாரிப்புகளுக்கு ஏதேனும் கொள்முதல் திட்டம் இருந்தால், எங்களைத் தொடர்புகொள்ள தயங்க வேண்டாம். மின்னஞ்சலில் எங்களுக்கு செய்தி அனுப்பலாம்[மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது]அல்லது[மின்னஞ்சல் பாதுகாக்கப்பட்டது], அல்லது எங்களை +86 15810650221 என்ற எண்ணில் அழைக்கவும் அல்லது Whatsapp +86 15810650221 ஐச் சேர்க்கவும் அல்லது Wechat: 15810650221